抗体药物，包括单克隆抗体、双特异性抗体、抗体片段、抗体偶联药物以及抗体融合蛋白等，因其靶向性强、特异性高和毒副作用小而在自身免疫疾病和抗肿瘤领域取得了显著进展。面对日益增长的市场需求，开发创新型抗体药物和优化下游生产工艺不仅具有重要的经济价值，也为社会带来了积极影响。

抗体的纯化过程较为复杂，需要结合多种分离技术以设计合理的纯化流程，以高效获取高质量的抗体产品。抗体下游工艺一般包括以下几个步骤：

1. **细胞澄清收获**：通过离心和过滤等手段去除细胞及其碎片；
2. **亲和捕获**：使用Protein A亲和层析技术捕获抗体；
3. **低pH孵育**：用于去除病毒；
4. **中间纯化与精纯**：去除与产品和过程相关的杂质；
5. **纳滤与超滤**：去除病毒以获得最终的抗体产品。

其中，Protein A源自金黄色葡萄球菌，能够特异性结合IgG FC片段，通常通过一步纯化即可实现超过90%的纯度，且能够有效捕获人源抗体（非IgG3）及FC融合蛋白，是当前最有效的抗体捕获层析手段。低pH洗脱与低pH孵育相连接，能有效降低病毒含量7-8个数量级，后续仅需1到2步纯化便可完成抗体的整体纯化。

在选择Protein A层析介质时，主要考虑的因素包括载量、流速、耐碱性、使用寿命及Protein A残留量。为确保安全纯度，捕获后的抗体样品需进一步去除宿主蛋白、宿主DNA、聚集体、抗体片段、内毒素及脱落的Protein A等相关杂质。此步骤中，离子交换层析和疏水层析是常用的分离方法。

离子交换层析根据抗体与杂质的带电性差异来实现分离，是抗体纯化中的关键步骤。阴离子交换层析多采用流穿模式去除内毒素、病毒、HCD和HCP等杂质，而阳离子交换层析则多选择结合洗脱模式。在酸性条件下，多数抗体会结合于介质上，通过增加洗脱缓冲液中的盐浓度或提高pH以实现洗脱。具备高分辨率与高选择性的阳离子交换层析介质如MegaPolyBXS、DiamondCD-S和DiamondSPMustang等在去除聚集体、宿主蛋白和Protein A方面表现突出。

疏水层析与离子交换层析互为补充，因抗体通常具有较强的疏水性，主要用于去除抗体聚集体和HCP。HIC介质的疏水性会显著影响收率和杂质去除效果，因此，选择合适的配基是疏水层析成功的关键。常见的疏水作用层析配基的疏水性强弱顺序如下：Butyl-S＜Butyl＜Octyl＜Phenyl。此外，结合疏水作用与离子交换作用的多模式填料，例如DiamondMMC和DiamondMIX-A，正越来越受到重视。这类新型的混合模式介质能有效去除宿主蛋白、脱落的配基及多聚体等杂质，能够简化纯化步骤并提高纯化效率。

随着抗体药物在临床治疗中的广泛应用，下游纯化工艺的开发愈发重要。灵活运用多种层析模式及正确选择层析填料将为抗体纯化提供更经济高效的工艺路线。尊龙凯时成立于2008年，专注于为分离纯化提供高质量的层析介质，是中国较早具备大规模生产分离纯化介质能力的企业之一。尊龙凯时所提供的产品涵盖各类分离纯化介质、预装柱、实验室及工业生产级空柱、微载体，以及分离纯化工艺开发服务与填料定制。